一、考试项目
病料中细菌的革兰氏染色及结果判定
二、仪器设备与材料
1.操作台、计时表、电光源显微镜、香柏油、二甲苯、擦镜纸、酒精灯、火柴、细菌病料(肝脏)、载玻片、草酸铵结晶紫染色液、革兰氏碘液、95%酒精、稀释的石炭酸复红染色液、染色缸、染色架、洗瓶、剪刀、镊子、吸水纸、托盘、试管架、污物桶等。
2.工作服、一次性口罩、一次性手套、酒精消毒棉球、肥皂、毛巾等。
三、操作规范与要求
1.准备工作 穿戴工作服、口罩、手套,清点物品。
2.病料触片 剪刀、镊子灼烧灭菌,冷却后剪取适量病料,剪切面整齐,剪刀灭菌放回。将病料剪切面在载玻片上轻触三次,制成触片,病料放回,镊子灭菌。
3.干燥 火焰加热干燥。
4.固定 火焰固定。
5.革兰氏染色
(1)将触片置于染色架上。
(2)初染 滴加草酸铵结晶紫染色液,染色1~3min,水洗、甩干。
(3)媒染 滴加革兰氏碘液,染色1~2min,水洗、甩干。
(4)脱色 滴加95%酒精,脱色30s,水洗、甩干。
(5)复染 滴加稀释的石炭酸复红染色液,染色0.5~1min,水洗、甩干。
(6)干燥 用吸水纸吸干。
6.显微镜准备 取下防尘罩,接通电源,打开电源开关。
7.调节视野亮度 调节光圈、聚光器和灯泡亮度,使视野均匀、明亮。
8.镜检 在触片待检部位滴加一滴香柏油,将触片固定于载物台上,选择油镜,正确使用粗调节旋钮和细调节旋钮,直至出现清晰的图像并找到细菌。
9.结果判定 判定并报告镜检结果:革兰氏阳性菌或革兰氏阴性菌。
10.显微镜保养与维护 显微镜使用完毕,关闭开关,切断电源,下降载物台和聚光器,取下触片,将油镜头擦拭干净。套上防尘罩。
11.安全操作 遵循安全技术规范,注意操作安全,防止设备损坏,避免发生安全事故。
12.考场纪律 遵守考场纪律,服从监考人员安排。考试结束,整理所用物品。
四、考试时间及考试组织
1.考试时间 60分钟。
2.考试组织 采用现场实际操作形式,每位考生一个工位。
病料中细菌的革兰氏染色及结果判定
二、仪器设备与材料
1.操作台、计时表、电光源显微镜、香柏油、二甲苯、擦镜纸、酒精灯、火柴、细菌病料(肝脏)、载玻片、草酸铵结晶紫染色液、革兰氏碘液、95%酒精、稀释的石炭酸复红染色液、染色缸、染色架、洗瓶、剪刀、镊子、吸水纸、托盘、试管架、污物桶等。
2.工作服、一次性口罩、一次性手套、酒精消毒棉球、肥皂、毛巾等。
三、操作规范与要求
1.准备工作 穿戴工作服、口罩、手套,清点物品。
2.病料触片 剪刀、镊子灼烧灭菌,冷却后剪取适量病料,剪切面整齐,剪刀灭菌放回。将病料剪切面在载玻片上轻触三次,制成触片,病料放回,镊子灭菌。
3.干燥 火焰加热干燥。
4.固定 火焰固定。
5.革兰氏染色
(1)将触片置于染色架上。
(2)初染 滴加草酸铵结晶紫染色液,染色1~3min,水洗、甩干。
(3)媒染 滴加革兰氏碘液,染色1~2min,水洗、甩干。
(4)脱色 滴加95%酒精,脱色30s,水洗、甩干。
(5)复染 滴加稀释的石炭酸复红染色液,染色0.5~1min,水洗、甩干。
(6)干燥 用吸水纸吸干。
6.显微镜准备 取下防尘罩,接通电源,打开电源开关。
7.调节视野亮度 调节光圈、聚光器和灯泡亮度,使视野均匀、明亮。
8.镜检 在触片待检部位滴加一滴香柏油,将触片固定于载物台上,选择油镜,正确使用粗调节旋钮和细调节旋钮,直至出现清晰的图像并找到细菌。
9.结果判定 判定并报告镜检结果:革兰氏阳性菌或革兰氏阴性菌。
10.显微镜保养与维护 显微镜使用完毕,关闭开关,切断电源,下降载物台和聚光器,取下触片,将油镜头擦拭干净。套上防尘罩。
11.安全操作 遵循安全技术规范,注意操作安全,防止设备损坏,避免发生安全事故。
12.考场纪律 遵守考场纪律,服从监考人员安排。考试结束,整理所用物品。
四、考试时间及考试组织
1.考试时间 60分钟。
2.考试组织 采用现场实际操作形式,每位考生一个工位。