一、考试项目
细菌液体培养物革兰氏染色及镜检
二、仪器设备与材料
1．细菌液体培养物、接种环、载玻片、镊子、酒精灯、火柴、草酸铵结晶紫染色液、革兰氏碘液、95%酒精、石炭酸复红染色液、计时表、染色缸、染色架、洗瓶、吸水纸、显微镜（型号SDPTOP-E5系列）、香柏油、乙醇乙醚、擦镜纸、托盘、试管架、项目报告单、中性笔等。
2．一次性工作服、一次性口罩、一次性手套、酒精棉球、擦手纸巾、肥皂、污物桶等。
三、操作规范与要求
1．准备工作穿工作服，戴口罩、手套，清点物品。
2．标本片制备（1）涂片用接种环无菌操作钩取细菌液体培养物，均匀涂布于载玻片中央。（2）干燥火焰加热干燥。（3）固定火焰固定。
3．革兰氏染色（1）将标本片置于染色架上。（2）滴加草酸铵结晶紫染色液，初染1～3min，水洗，甩干。（3）滴加革兰氏碘液，媒染1～2min，水洗，甩干。（4）滴加95%酒精，脱色30s，水洗，甩干。（5）滴加石炭酸复红染色液，复染0.5～1min，水洗，甩干。（6）将标本片用吸水纸吸干。
4．显微镜准备将显微镜置于合适位置，接通电源，打开开关。调节光圈、聚光器和光源亮度，使视野均匀、明亮。
5．镜检在标本片待检部位滴加香柏油，将标本片固定于载物台上，选择油镜，操作粗调节旋钮和细调节旋钮，直至出现清晰的物像，并使指针指向细菌。
6．结果报告填写项目报告单，报告考评员确认结果。结果报告后，禁止再调试显微镜。
7．显微镜保养与维护显微镜使用完毕，关闭开关，切断电源，下降载物台和聚光器，取下标本片，将油镜头擦拭干净。显微镜放回原处。
8．安全操作遵循安全技术规范，注意操作安全，防止设备损坏，避免发生安全事故。考试结束，整理所用物品。
9．考场纪律遵守考场纪律，服从监考人员安排。
四、考试时间及考试组织
1．考试时间60分钟。
2．考试组织采用现场实际操作形式，每位考生一个工位。
